BD PAXgene Blood RNA Tubes (IVD)

產(chǎn)品詳細(xì)信息

PAXgene血液RNA系統(tǒng)由PAXgene血液RNA管(可從BD，貓。不。762165)用于血液采集、穩(wěn)定和運(yùn)輸，PAXgene血液RNA試劑盒用于硅膠膜RNA分離和自旋柱格式的純化。凈化可以手工進(jìn)行，使用微量離心機(jī)，或在QIAcube自動(dòng)進(jìn)行。ce - ivd標(biāo)記管和試劑盒提供精確的性能規(guī)格，確保高度可靠的RNA純化。

性能

PAXgene血液RNA管的目的是收集的全血和穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)RNA長(zhǎng)達(dá)3天的年齡在18歲至25歲之間°C(見圖“RNA穩(wěn)定°C:年齡在18歲至25歲之間的安全系數(shù)"和“RNA穩(wěn)定°C:年齡在18歲至25歲之間IL1B")或5天2 - 8°C(見圖“RNA穩(wěn)定在2 - 8°C:安全系數(shù)"和“RNA穩(wěn)定在2 - 8°C: IL1B")。目前可用的數(shù)據(jù)顯示，細(xì)胞RNA在-20°C或-70°C下至少可以穩(wěn)定96個(gè)月。

使用PAXgene Blood RNA System純化的總RNA純度高，A260/A280值在1.8 - 2.2之間，≤1.0% (w/w)基因組DNA。當(dāng)使用高達(dá)30%的洗脫液時(shí)，至少95%的樣品在RT-PCR中沒有顯示抑制作用。

平均樣品制備時(shí)間(基于12個(gè)樣品制備的數(shù)據(jù))約為90分鐘，只有40分鐘的動(dòng)手時(shí)間。在處理過(guò)的樣本中，≥95%的2.5 ml健康人全血的RNA產(chǎn)量≥3µg。由于產(chǎn)量高度依賴于捐助者，個(gè)別產(chǎn)量可能有所不同。個(gè)人捐贈(zèng)者,PAXgene血液RNA系統(tǒng)提供高度可再生的和可重復(fù)的收益率(見圖“可再生的和可重復(fù)的RNA凈化"和“重復(fù)性和再現(xiàn)性的RNA收益率")和可重復(fù)的和可重復(fù)的rt - pcr(見圖“用戶之間的重現(xiàn)性"和“再現(xiàn)性工具包之間很多",和表格)，使其在臨床診斷測(cè)試中非?？煽?。

經(jīng)處理的樣本中，≥95%的2.5 ml健康人全血的RNA產(chǎn)量≥3 μg。圖“RNA產(chǎn)率和純度-自動(dòng)化處理"表示的是由3個(gè)操作員使用3個(gè)試劑盒批次的自動(dòng)化方案制備的共288個(gè)樣品的RNA產(chǎn)率。由于這些研究使用的是匯集的血液樣本，而不是單獨(dú)的PAXgene血液RNA管，因此結(jié)果不能反映單個(gè)血樣的RNA產(chǎn)量。由于產(chǎn)量高度依賴于捐助者，個(gè)別產(chǎn)量可能有所不同。

當(dāng)使用高達(dá)30%的洗脫液時(shí)，至少95%的樣品在RT-PCR中沒有顯示抑制作用。使用自動(dòng)化程序，通過(guò)定量、實(shí)時(shí)RT-PCR檢測(cè)rna陰性樣本(水)和rna陽(yáng)性樣本(人類全血)的β -球蛋白和FOS轉(zhuǎn)錄本序列，無(wú)法檢測(cè)樣品之間的交叉污染。

用PAXgene血RNA系統(tǒng)純化的RNA和自動(dòng)化的協(xié)議是高純度的，因?yàn)槿狈T-PCR抑制(見上文)和A260/A280值在1.8和2.2之間。通過(guò)對(duì)β -肌動(dòng)蛋白基因序列的實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)，在≥95%的樣本中，基因組DNA含量≤1% (w/w)。圖“RNA產(chǎn)量和純度-自動(dòng)化處理"顯示了使用3個(gè)試劑盒批次的自動(dòng)化方法制備的共288個(gè)樣品的A260/A280值和相對(duì)基因組DNA。

使用PAXgene血RNA系統(tǒng)的RNA純化自動(dòng)化方案提供了高重復(fù)性和可重復(fù)性的RT-PCR結(jié)果，如圖“自動(dòng)和手動(dòng)方案之間的重現(xiàn)性"所示，這使得它在臨床診斷測(cè)試中非常可靠。

過(guò)程

PAXgene Blood RNA程序簡(jiǎn)單，可以使用手動(dòng)或自動(dòng)程序進(jìn)行(見流程圖“手動(dòng)PAXgene Blood RNA程序"和“自動(dòng)PAXgene Blood RNA程序")。

手動(dòng)PAXgene血液RNA程序

將重懸的顆粒與蛋白酶K一起孵育在優(yōu)化的緩沖液中，以實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)消化。通過(guò)PAXgene Shredder旋轉(zhuǎn)柱進(jìn)行額外的離心，使細(xì)胞裂解液均質(zhì)并清除殘留的細(xì)胞碎片，并將流過(guò)部分的上清液轉(zhuǎn)移到新鮮的微型離心管中。加入乙醇調(diào)節(jié)結(jié)合條件，將裂解液應(yīng)用于PAXgene RNA自旋柱。在一個(gè)簡(jiǎn)短的離心過(guò)程中，當(dāng)污染物通過(guò)時(shí)，RNA被選擇性地結(jié)合到PAXgene硅膜上。在幾個(gè)有效的清洗步驟中去除剩余的污染物。在第一和第二沖洗步驟之間，用DNase I處理膜以去除微量的結(jié)合DNA。洗滌步驟結(jié)束后，RNA在洗脫緩沖液中洗脫并熱變性。

全自動(dòng)PAXgene血液RNA程序

QIAcube全自動(dòng)樣品制備，遵循與手動(dòng)程序相同的步驟，使您可以繼續(xù)使用PAXgene血液RNA試劑盒純化高質(zhì)量的RNA。

自動(dòng)RNA純化協(xié)議包括兩部分(或協(xié)議)，“PAXgene Blood RNA Part A"和“PAXgene Blood RNA Part B"，在這兩部分之間有一個(gè)簡(jiǎn)短的人工干預(yù)。

將離心、洗滌、重懸的核酸顆粒從PAXgene Blood RNA Tube轉(zhuǎn)移到加工管中，加工管放置在QIAcube工作臺(tái)上的熱搖器單元中。操作者從菜單中選擇并啟動(dòng)“PAXgene Blood RNA Part A"協(xié)議。QIAcube完成了在洗脫緩沖液中進(jìn)行RNA洗脫的步驟。操作人員將含有純化RNA的微離心管轉(zhuǎn)移到QIAcube的熱激器單元中。操作者從菜單中選擇并啟動(dòng)“PAXgene Blood RNA Part B"協(xié)議，QIAcube進(jìn)行熱變性。

平均樣品制備時(shí)間(基于12個(gè)樣品制備的數(shù)據(jù))是125分鐘，只有大約20分鐘的動(dòng)手時(shí)間。

BD PAXgene Blood RNA Tubes (IVD)應(yīng)用程序

當(dāng)該試劑盒與PAXgene血液RNA管一起使用時(shí)，該系統(tǒng)提供全血的細(xì)胞內(nèi)RNA用于分子診斷檢測(cè)的RT-PCR。

美國(guó)BD樣品前處理耗材長(zhǎng)期現(xiàn)貨供應(yīng)

762165 PAXgene全血RNA管

218962 Streck 游離管

328421 1ml胰島su注she器  

320310  1ml胰島su注she器

320312  0.5ml胰島su注she器

309628  1ml螺口 一盒100支

309657  3ml螺口 一盒200支

302113 3ml螺口一盒100支

309646   5ml螺口 一盒125支

302995  10ml螺口 一盒200支

302830  20ml螺口 一盒48支

B300141  20ml螺口 一盒50支

302832  30ml螺口 一盒56支

300144  50ml螺口 一盒40支

300143  50ml直口 一盒40支

300841  25G 1ml （帶針頭0.5x16mm）一次性直口注she器100支/盒

307730   2m1  23G*11/4"(0.6*30mm) 一次性使用注she器 100支/盒

301942  5ml 22G （帶針頭 0.7×32mm）一次性直口注she器100支/盒 

301945  10ml 22G（ 帶針頭0.7*32mm）一次性直口注she器100支/盒 

301947  10ml 21G（帶針頭0.8x38mm）一次性直口注she器100支/盒 

301948  20ml 18G （帶針頭 1.2×38mm）一次性直口注she器80支/盒 

360213  21G 1/5（0.8*38mm）一次性注she針 100支/盒

302008  23G 1/4（0.66mm*32mm）一次性注  射針 100支/盒

301805  25G 5/8(0.5mm*16mm) 一次性注she針 100支/盒

305106  30G 1/2(0.3mm*13mm)一次性注she針 100支/盒

305200 一次性BD過(guò)濾針頭19GA 1 1/2IN 100支/盒

302032 一次性針頭18G1 1/2 TW（1.2mm*38mm） 100支/盒

301801 27G（0.4mm*13mm）一次性使用針頭 100支/盒

301808 25G 11/2(0.5mm*38mm) 100支/盒

365974 0.5mlEDTA真空抗凝微量紫蓋管200支/盒

367841 2ml（K2-EDTA）真空抗凝紫蓋管100支/盒

367856  3ml（K2-EDTA）真空抗凝紫蓋管100支/盒

367861 4ml（K2-EDTA）真空抗凝紫蓋管100支/盒

367863 6ml（K2-EDTA）真空抗凝紫蓋管100支/盒

367525 10ml（K2-EDTA）真空抗凝紫蓋管100支/盒

367884 4ml肝素li抗ning真空綠蓋管100支/盒

367886 6ml肝素li抗ning真空綠蓋管100支/盒

367880  10ml肝素li抗ning真空綠蓋管100支/盒

367871 4ml肝素na抗ning真空綠蓋管100支/盒

367878 6ml肝素na抗ning真空綠蓋管100支/盒

367874 10ml肝素na抗ning真空綠蓋管100支/盒

367814 5ml血清促ning真空紅蓋管100支/盒

367815 6ml血清促ning真空紅蓋管100支/盒

367820  10ml血清促ning真空紅蓋管100支/盒

367957 3.5ml sstII血清分離膠、促ning劑真空黃蓋管100支/盒 

367955 5ml sstII分離膠、促ning劑真空黃蓋管100支/盒 

367986 5ml SST I 血清分離膠、促ning劑真空黃蓋管100支/盒